ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ಪರಿಚಯ

ⅠNಯುಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲiಪರಿಚಯ

ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲವನ್ನು ಡಿಯೋಕ್ಸಿರೈಬೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ (ಡಿಎನ್ಎ) ಮತ್ತು ರೈಬೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲ (ಆರ್ಎನ್ಎ) ಎಂದು ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ, ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಆರ್ಎನ್ಎ ರೈಬೋಸೋಮಲ್ ಆರ್ಎನ್ಎ (ಆರ್ಆರ್ಎನ್ಎ), ಮೆಸೆಂಜರ್ ಆರ್ಎನ್ಎ (ಎಂಆರ್ಎನ್ಎ) ಮತ್ತು ಅದರ ವಿಭಿನ್ನ ಕಾರ್ಯಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಆರ್ಎನ್ಎ (ಟಿಆರ್ಎನ್ಎ) ಅನ್ನು ವರ್ಗಾಯಿಸುತ್ತದೆ.ಡಿಎನ್‌ಎ ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್, ಮೈಟೊಕಾಂಡ್ರಿಯಾ ಮತ್ತು ಕ್ಲೋರೊಫಾರ್ಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರೀಕೃತವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಸೈಟೋಪ್ಲಾಸಂನಲ್ಲಿ ವಿತರಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ.ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ವಸ್ತು ಆಧಾರವಾಗಿ, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಆಣ್ವಿಕ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರ ಸಂಶೋಧನೆ ಮತ್ತು ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಆಣ್ವಿಕ ರೋಗನಿರ್ಣಯದಲ್ಲಿ ಅತ್ಯಂತ ಪ್ರಮುಖ ಪಾತ್ರವನ್ನು ವಹಿಸುತ್ತದೆ.ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಯ ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧತೆಯು ನಂತರದ PCR, ಅನುಕ್ರಮ, ವೆಕ್ಟರ್ ನಿರ್ಮಾಣ, ಕಿಣ್ವ ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆ ಮತ್ತು ಇತರ ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಮೇಲೆ ನೇರವಾಗಿ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆ.

Ⅱ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಣ ವಿಧಾನ 

① ಫೀನಾಲ್/ಕ್ಲೋರೋಫಾರ್ಮ್ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ವಿಧಾನ

ಫೀನಾಲ್/ಕ್ಲೋರೊಫಾರ್ಮ್ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಡಿಎನ್‌ಎ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆಗೆ ಒಂದು ಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ, ಇದು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ನೀಡಲು ಎರಡು ವಿಭಿನ್ನ ಸಾವಯವ ದ್ರಾವಕಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ, ಡಿಎನ್‌ಎ ಆಧಾರಿತ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲವನ್ನು ನೀರಿನ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸುತ್ತದೆ, ಸಾವಯವ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಲಿಪಿಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಎರಡು ಹಂತಗಳ ನಡುವಿನ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳು.ಈ ವಿಧಾನವು ಕಡಿಮೆ ವೆಚ್ಚ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಶುದ್ಧತೆ ಮತ್ತು ಉತ್ತಮ ಪರಿಣಾಮದ ಪ್ರಯೋಜನಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ.ಅನಾನುಕೂಲಗಳು ಸಂಕೀರ್ಣವಾದ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆ ಮತ್ತು ದೀರ್ಘಕಾಲದವರೆಗೆ.

② ಟ್ರೈಝೋಲ್ ವಿಧಾನ

ಟ್ರೈಝೋಲ್ ವಿಧಾನವು ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಒಂದು ಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ.ಟ್ರೈಝೋಲ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಕ್ಲೋರೊಫಾರ್ಮ್ನೊಂದಿಗೆ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿಗೊಳಿಸಿದ ನಂತರ ಜಲೀಯ ಹಂತ ಮತ್ತು ಸಾವಯವ ಹಂತಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ಆರ್ಎನ್ಎ ಜಲೀಯ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಕರಗುತ್ತದೆ, ಜಲೀಯ ಹಂತವನ್ನು ಹೊಸ ಇಪಿ ಟ್ಯೂಬ್ಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಐಸೊಪ್ರೊಪನಾಲ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿದ ನಂತರ ಮಳೆಯನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ನಂತರ ಎಥೆನಾಲ್ ಶುದ್ಧೀಕರಣ.ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಅಂಗಾಂಶಗಳು, ಜೀವಕೋಶಗಳು ಮತ್ತು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳಿಂದ ಆರ್ಎನ್ಎ ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಈ ವಿಧಾನವು ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ.

③ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಕಾಲಮ್ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ವಿಧಾನ

ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಕಾಲಮ್ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ವಿಧಾನವು ವಿಶೇಷ ಸಿಲಿಕಾನ್ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ ಹೊರಹೀರುವಿಕೆ ವಸ್ತುಗಳ ಮೂಲಕ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸರಾಗವಾಗಿ ಹಾದುಹೋಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲವನ್ನು ಸಂಯೋಜಿಸಲು ಹೆಚ್ಚಿನ ಉಪ್ಪು ಕಡಿಮೆ PH ಅನ್ನು ಬಳಸಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲವನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಲು ಕಡಿಮೆ ಉಪ್ಪು ಹೆಚ್ಚಿನ PH ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ.ಪ್ರಯೋಜನಗಳೆಂದರೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಸಾಂದ್ರತೆ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಸ್ಥಿರತೆ, ಸಾವಯವ ದ್ರಾವಕದ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆ ವೆಚ್ಚ.ಅನನುಕೂಲವೆಂದರೆ ಇದು ಹಂತ ಹಂತವಾಗಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮಾಡಬೇಕಾಗಿದೆ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ಹಂತಗಳು.